采样注意事项
眼部鼻部咽部拭子采集
将无菌棉拭子前端用无菌生理盐水润湿后,翻开动物眼睑,用棉拭子轻轻滚动蘸取眼结膜表面细胞成分,并蘸取眼部分泌物,注意即使只有一个眼睛感染也需要采集两个眼睛的样本(可以先采集健康眼睛);
使用同一棉拭子,轻轻插入动物鼻孔,停留数秒并转动棉拭子,采集黏膜表面细胞成分后取出;
使用同一棉拭子,采集口腔黏膜,必要时需要采集深咽部和扁桃体(该动作可能会导致动物呕吐);
样本采集完毕后浸泡在样本保存液中。
肛拭子采集
将无菌棉拭子前端用无菌生理盐水或PBS溶液润湿后,轻柔插入动物肛门并轻轻旋转,保证棉拭子上有适量样本后取出;
若棉拭子上的粪便量过多,可能影响扩增效果,需另取一个新的棉拭子蘸取适量样本;
样本采集完毕后浸泡在样本保存液中。
血液样本采集
无菌采集静脉血至含抗凝剂EDTA的采血管中,轻轻上下颠倒混匀,避免发生溶血现象。
胸水/腹水采集
使用一次性无菌注射器采集胸水/腹水样本,放入无菌EP管中密封保存。
化验室注意事项
划分实验区域
实验操作最好在相对独立的空间,并尽量远离患有传染病的动物。
清洁实验环境
每次进行实验后,需及时清理台面,可用酒精擦拭,以减少阳性物质的残留。
使用实验工具
实验所需的仪器耗材,尽量专物专用,用后归位摆放整齐,避免交叉污染。
清洁实验工具
实验服定期清洗,移液枪、试管架等定期消*。
佩戴手套
建议佩戴一次性乳胶手套进行采样及实验操作,注意手套不能含有荧光剂。
通风换气
实验区域要保持通风换气,有条件可配备超净台或生物安全柜。
检测注意事项
接种疫苗对核酸检测的影响
弱*疫苗含有*力较弱的病*或细菌,接种后会在机体中引起免疫反应,导致低水平感染并在机体内复制,但不会引起明显组织病理改变或传染病的临床症状;
疫苗可能在免疫后8至10天才开始产生保护力,如果在此之前已经感染病原,即使注射疫苗,宠物仍可能发病;
因此,宠物接种疫苗后,对疫苗中所含病原进行核酸检测,出现阳性结果时无法区分阳性物质来源于疫苗或是自然感染,需要结合临床症状和其他检查结果进一步诊断。
治疗用药对核酸检测的影响
宠物出现临床症状后,通常给予抗菌药物、抗病*药物、单克隆抗体等进行对症治疗,机体内病原含量可能大幅下降,此时对病原进行核酸检测,会出现阴性结果或Ct值偏高的情况。
Tips:核酸检测过程中,采样环节和化验室环境对检测结果的准确性至关重要。同时,需要掌握宠物的免疫情况和用药史,对检测结果进行综合分析,有助于诊断及治疗。