截性克隆病治疗

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TUhjnbcbe - 2021/4/22 9:34:00
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结核病(tuberculosis),是由结核分枝杆菌引起的传染性疾病,主要通过呼吸道或消化道传染。全身各个脏器几乎都能引起结核菌感染,最常见的患病部位是肺,占各器官结核病总数的80%-90%。目前世界上有三分之一的人有结核分枝杆菌感染,而且其中大约10%会发展成活动性结核。

结核病诊断技术

直接检测

细菌学诊断(结核菌培养、抗酸染色镜检)、免疫学诊断(结核菌素试验)、分子诊断(核酸诊断技术)等;

间接检测

影像学诊断(X射线)、细胞+免疫学诊断(免疫斑点技术、体外释放γ干扰素检测)等;

我科开展的结核辅助诊断相关检测有结核菌培养、抗酸染色镜检、结核抗体、结核杆菌特异性细胞免疫反应检测及结核分枝杆菌分子检测。

优缺点

1.结核菌培养耗时较长(4-8周)、检出率低(50%,涂阴的检出率22%-38%)、诊断肺外结核难。

2.抗酸染色镜检不能区分NTM、检出率低(20%)、诊断肺外结核难。

3.结核抗体试验阳性结果提示患有活动性结核感染,但不能排除其他病原体的存在、早期结核感染抗体浓度低可能会导致假阴性结果、与其他分枝杆菌感染有很高的交叉反应、结核病人在发病晚期由于免疫抑制作用会显示阴性结果。

以下主要介绍检验科开展的结核杆菌特异性细胞免疫反应检测及结核分枝杆菌分子检测。

一.结核杆菌特异性细胞免疫反应检测(γ-干扰素释放试验)

近年来,γ-干扰素释放试验(interferongammareleaseassay,IGRA)得到发展,这类试验采用ELISA/ELISPOT(酶联免疫吸附/酶联免疫斑点)方法定量检测外周血特异性T细胞在结核菌特异性抗原刺激下释放γ-干扰素的水平,用于结核病的辅助诊断。美国CDC指南建议,在当前应用结核菌素试验的所有情况下均可采用IGRA替代。

1.γ-干扰素来自淋巴细胞,是在特定诱导剂作用下,细胞产生的一种具有高度生物学活性的糖蛋白,作用于其他细胞时,使其获得抗病*和抗肿瘤等多方面的免疫力。

2.受到结核分枝杆菌抗原刺激致敏的T淋巴细胞再次遇到同类抗原时可产生γ-干扰素,IGRA通过检测全血中T淋巴细胞在结核分枝杆菌特异性抗原刺激下产生的γ-干扰素,判断受试者是否感染结核分枝杆菌。

3.IGRA采用体外释放免疫夹心法原理进行检测。通过结核分枝杆菌特异性抗原刺激结核分枝杆菌感染者特异性T淋巴细胞并使其释放IFN-γ。用IFN-γ包被抗体制备磁微粒混悬液,辣根过氧化物酶标记IFN-γ抗体制备酶结合物。通过免疫反应形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,该复合物催化发光底物发出光子,发光强度与IFN-γ的含量成正比。

4.TB-IGRA的临床应用

①肺结核的辅助诊断、鉴别诊断;②原因不明发热患者的结核感染排筛;③阴性结果对肺炎、肺癌、不明原因胸腹腔积液/心包积液/脑积液等有较好的鉴别诊断价值;④特殊与高危人群结核病的筛查:免疫治疗前后结核筛查;血液病治疗前后的结核筛查;艾滋病人结核筛查;年老体弱患者免疫状态筛查;⑤肺外结核:结核性腹膜炎、结核性脑膜炎、骨结核、肾结核、生殖系统结核等各种肺外结核的辅助诊断和鉴别诊断;⑥潜伏性感染监控和抗结核治疗效果评估。

5.结果参考范围

阴性对照培养孔(N)含量值=N,阳性对照培养孔(P)含量值=P,测试培养孔(T)含量值=T(单位IU/ml)。

①N值:无抗原的缓冲液刺激后的结果及患者自身血液中γ-干扰素含量,在检测中作为本底要被减去。正常人检测的N值一般会在2IU/ml以下,但并非大于此结果的患者就为异常,检测局部炎症和全身炎症反应的患者样本中γ-干扰素含量会存在部分样本的N值大于2IU/ml的情况,所以对于大于2IU/ml的样本需要综合分析。

②P值:非特异性抗原刺激淋巴细胞的结果,反馈的是产生γ-干扰素的T淋巴细胞对于外界刺激的应激反应性,并非真实的阳性样本。当T淋巴细胞的活性被抑制或存在免疫系统疾病时,可能会出现低于10IU/ml的情况,此时需要分析血常规淋巴细胞的总数是否存在异常或患者是否存在可能导致淋巴细胞异常的其他疾病,所以对于导致P值异常的情况建议综合分析。

③T值:结核分枝杆菌特异性抗原刺激淋巴细胞的结果,此特异性抗原仅有结核分枝杆菌的RD1区域分泌,卡介苗、非结核等分枝杆菌中没有,如患者感染结核分枝杆菌,其T孔的测试结果要明显高于N孔。

④参考值组合的设定是为了协助临床进行结果的判定:为了正确反映健康人体内免疫系统对外来非特异性抗原刺激的反应,需要排除待测者体内可能存在的γ-干扰素的影响,因此需要使用“P-N”值参与统计计算;为了正确反映患者体内免疫系统对结核分枝杆菌特异性抗原的刺激反应,需要排除患者体内可能存在的γ-干扰素的影响,因此使用“T-N”值参与统计计算。两种参考值的

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