截性克隆病治疗

首页 » 常识 » 问答 » 关注两名患者CART治疗十年随访的分子
TUhjnbcbe - 2024/2/4 15:55:00
专业治疗白癜风的医院哪家好 https://yyk.familydoctor.com.cn/2831/schedule_100357_1/

撰文

雪月

责编

#肿瘤#

对T细胞进行重编程以靶向肿瘤并进行过继回输的方法已经在多种肿瘤治疗中显示效果。使用CD19特异性CART细胞(CTL)治疗复发性、难治性B细胞恶性肿瘤已经被证明效果持久。CART细胞功能持续性是维持持久临床反应性的关键。然而对于过继回输之后细胞的长期功能以及克隆稳定性还尚不清楚。

作为I期试验的一部分,两名慢性淋巴细胞白血病CLL患者在年使用CTL细胞获得完全缓解和持久性反应性。这些长期完全反应的患者为探究CLL中过继回输T细胞的分子和功能特征提供了条件。

年2月2日,来自宾夕法尼亚大学的J.JosephMelenhorst团队在Nature上发表题为Decade-longleukaemiaremissionswithpersistenceofCD4+CARTcells的文章。本研究发现这两名患者在T细胞过继回输十多年后最后一次随访病情仍处于缓解状态,并用单细胞多组学技术分析了CTL细胞的特征。

作者从过继回输开始多个时间点开始分析,直到第十年。作者发现患者一CTL的扩增峰值在第3天,患者峰值在第31天,可能是由于患者二输注的剂量低于患者一的78倍。患者一到输注后10年,患者二到输注后9年,CTL细胞都可以检测到,分别占T细胞的0.8%和0.1%。流式检测表明过继治疗3年后,CLL细胞无法检测或者高度抑制。

为了了解CART细胞扩增的克隆性质,作者接下来分选了CART细胞,对TCRβ链进行TCR-seq深度测序以及慢病*载体整合位点LVIS分析。患者一的克隆转变发生在2.3月和1.4年。而患者二的克隆组成总体上较稳定,在前两年逐渐发生转变。LVIS检测显示出一致的结果。进一步分析发现患者一的CART细胞库在晚期时间点稳定,患者二的晚期时间点CART稳定性不明确。而两名患者的整合位点不重叠。

作者利用CyTOF和40种抗体分析多个时间点的CART细胞表型。作者首先圈出CD3+CAR+T细胞,然后分析了每个患者五个时间点超过个细胞的数据。患者一,CD8+T细胞在1.8月占29.3%,随后不断减少,CD4+T细胞在1.4年占87.5%,在3.4年和9.3年占99.6%以上。患者二也有类似的变化趋势,初始时间CD8+占比较多,随后不点减少。作者还在患者二中观察到一群CD4-CD8-CART细胞,在2.5月和2年占比为33.4%和46.5%,随后下降。这群细胞随后经过单细胞转录组分析鉴定为γδT细胞,表达细胞*性标志物GZMBCD57PD-1和helios等。CD4+CART细胞稳定高表达Ki67,并且表达激活标志物和记忆性标志物,此表型在两名患者中都显著。而CD8+T细胞也表达Ki67,但水平和稳定性都低于CD4+T细胞。这些结果表明,在两名患者中,CART细胞治疗反应主要有两个阶段:以CD8+T细胞和CD4-CD8-helios+CART细胞为代表的初始反应阶段,和长期缓解阶段,特征为增殖性和溶细胞性CD4+CART细胞。

接下来作者利用单细胞TCR-seq和CITE-seq检测CD+CART细胞。检测发现在CD4+CART细胞里,共有27种独特的TCR克隆型,其中前三种占90%以上。13种TCR克隆型是在前两年检测到,峰值出现在1.9年。转录组分析再次证实了CD4+T细胞具有高度增殖能力,并且T细胞激活、TCR信号、OXPHS等富集明显。在CD4+CART中,GZMKGZMA是高表达最显著的两个基因,提示其具有独特的细胞*性。

本研究详细探究了两名患者体内CD19CART细胞的长达十年的细胞变化、功能和分子特征。这些发现为长期CART细胞的性质提供了新见解,为患者疾病长期缓解提供了理论支持。

原文链接:

1
查看完整版本: 关注两名患者CART治疗十年随访的分子