伯远医学是武汉伯远生物科技有限公司旗下全新开展的医学服务平台。伯远生物成立于年7月26日,位于东湖高新技术开发区光谷生物城武汉生物技术研究院B8栋。伯远生物专注于前沿分子生物学技术在生命科学研究和人类健康领域的应用和创新,致力于成为全球领先的基因科技产品和服务提供者。慢病*载体(Lentiviralvectors,LVs)是以人类免疫缺陷型病*(HIV)为基础发展起来的基因治疗载体,与逆转录病*一样,其也是一种RNA病*。根据不同的实验目的针对LVs改造以进行启动子活性研究、基因表达研究、基因沉默等研究。外源基因则通过载体中的多克隆位点插入LVs以进行表达。
背景说明
通常,LVs是通过反式互补产生的,其表达系统由用于表达特定基因的目的质粒及病*gag/pol、Rev和VSVG等组分的包装质粒组成,其中包装质粒提供了病*基因组mRNA包装成完整*粒所必需的结构蛋白、聚合酶和包膜蛋白。
LVs具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,区别于一般的逆转录病*载体,其对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。携带有外源基因的LVs在慢病*包装质粒、细胞系的辅助下,经过病*包装成为有感染力的病*颗粒,通过感染细胞或活体组织,实现外源基因在细胞或活体组织中表达。
通常根据不同的实验目的针对LVs改造以进行启动子活性研究、基因表达研究、基因沉默等研究。外源基因则通过载体中的多克隆位点插入LVs以进行表达。
图反式互补生产LVs(Mátraietal.)。
原理简介
携带有外源基因的LVs在慢病*包装质粒、细胞系的辅助下,经过病*包装成为有感染力的病*颗粒,通过感染细胞或活体组织,实现外源基因在细胞或活体组织中表达。
LVs包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病*包装质粒可提供所有的转录,并包装RNA到重组的假病*载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病*颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病*的包装,包装好的假病*颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。
通常根据不同的实验目的针对LVs改造以进行启动子活性研究、基因表达研究、基因沉默等研究。外源基因则通过载体中的多克隆位点插入LVs以进行表达。
图慢病*包装和侵染过程示意图
我司载体简介
我司可提供丰富的LVs产品体系,用于操作编码基因和非编码基因,如lncRNA、miRNA、circRNA。
我司原始细胞慢病*包装载体列表,可根据不同的需求,选择不同的载体,插入不同的位置
服务流程
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——构建LVs包装载体与目的载体——共转染29T细胞——病*上清收集——病*浓缩和纯化——慢病*鉴定(包括病*滴度、质粒残留、宿主DNA残留、BSA残留、支原体检测、衣原体检测、内*素检测、细菌及真菌检测等)——可选后续感染目的细胞及相关实验
服务内容及说明
服务内容及说明
慢病*滴度鉴定方法
适用范围
现在LV系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、miRNA研究以及活体动物实验中。
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